Menu

Nemzeti szivprogram

MTA Lendulet

 

 

 

 

A Semmelweis Egyetem Cell Sorter Core Facility különféle sejttípusok nagy tisztaságú izolálását teszi lehetővé számos különböző biológiai mintából, mind egyetemi, mind külső partnerek számára. A szolgáltatásban a Core Facility élvonalbeli eszköszparkja segítségével lehetőség nyílik

  • 2+6-paraméteres fluoreszcencia-alapú szortolásra (Sony LE-SH800SFP, chip-alapú új generációs fluoreszcens szorter)
  • automatizált MACS szortolásra (Miltenyi AutoMACS Pro)
  • élő sejtek intakt szövetekből való automatizált kinyerésére fluoreszcencia-alapú vagy MACS szortoláshoz (Miltenyi GentleMACS Octo)

A Core Facility munkatársai előzetes konzultációt követően, igény és megállapodás szerint nyújtanak támogatást a megfelelő izolálási és szortolási stratégia kiválasztásához, a szortoláshoz szükséges festő-vagy jelölő panel kialakításához, kiválasztásához, a szortolás optimalizálásához, és annak minőségellenőrzéséhez. Az igényelt szortolási és/vagy szöveti dezintegrációs munkákat szakképzett, tapasztalt munkatársaink végzik el, akik karrierjük során több ezer fluoreszcens és mágneses szortolási folyamatot végeztek el.

A Core Facility fluoreszcencia-alapú szorterének beszerzése az Nemzeti Szívprogram NVKP_16-1-2016-0017 pályázata, MACS szorterének és szövet-disszociátorának beszerzése az MTA Lendület Program LP2012-049/2012 pályázata támogatásával történt.

  

  • 2+6 paraméteres fluoreszcencia-alapú szortolás:

Sony sorterA fluoreszcencia-alapú szortolás egy 4 lézeres (488 nm, 405 nm, 638 nm and 561 nm), két scatter és hat fluoreszcens paraméter alapján szortoló, új generációs chip-alapú szorterkészüléken (Sony LE-SH800SFP) érhető el.

A szorter a 4 lézernek és sokoldalú filterrendszereinek (FL1 450/50, FL2 525/50, FL3 600/60, FL4  665/30, FL5 720/60, FL6 785/60, LP1 639LP, LP2 561LP, LP3 487.5LP, LP4 752LP, LP5 685LP) köszönhetően számos fluorokrómmal, fluoreszcens proteinnel és vitalitási vagy cell tracker festékkel képes együttműködni.

A teljesség igénye nélkül lehetőség van Brilliant Violet™421, Alexa Fluor® 405, DAPI, Pacific Blue™, mCFP, Hoechst 33342, EGFP, FITC, Alexa Fluor 488, EYFP, mCitrine, CFSE, PE, PE-Texas Red, PE-Dazzle™, Propidium Iodide, dsRed, tdTomato, mCherry, mPlum, 7-AAD, PE-Cy5, PE-Cy5.5, PerCP-Cy5.5, PE-Cy7, APC, Alexa Fluor 647, APC-Cy5.5, Alexa Fluor 700, APC-Cy7, APC-Alexa Fluor 750, és számos más jel alapú szortolásra, de számos egyéb rokon vagy helyettesítő fluorokróm is használható.

A szorter alkalmas kétutas, flow cytometriás-csőbe, 8 well strip-re, mikroszkópi tárgylemezre, és 6-,12-, 24-, 48-, 96- és 384-well plate-re való szortolásra egyaránt. Figyelem: a chip-alapú szortolás elvi és optikai háttere jelentősen különbözik a hagyományos szortolásétól, ezért bármilyen panel megtervezése előtt mindenképpen kérje munkatársaink segítségét.

Hasznos információk az alábbi oldalon:

 https://www.sonybiotechnology.com/wordpress/wp-content/uploads/2017/08/April_SH800S_Cell_Sorter_4rsweb.pdf

Kontaktszemély:

Név

Beosztás

E-mail

Dr. Komlósi Zsolt

egyetemi docens

Ez az e-mail-cím a szpemrobotok elleni védelem alatt áll. Megtekintéséhez engedélyeznie kell a JavaScript használatát.


  • Automatizált MACS szortolás:

AutoMACSA mágneses szortolás egy AutoMACS Pro (Miltenyi) készülék segítségével, steril boxban, automatizáltan, a mintákat  folyamatosan hűtött állapotban tartva, végig optimális és stabilizált áramlási sebesség mellett történik.

Mindez a manuális-gravitációs MACS szortoláshoz képest izolációs hatékonyságban, viabilitásban, reprodukálhatóságban és áteresztőképességben is jelentős előnyöket biztosít. A kísérleti paraméterektől függően egy munkafolyamatban 4-6 minta feldolgozására van lehetőség. Egyes szortolási protokollok esetében a jelölési folyamat automatizálására is lehetőség nyílik, ami tovább javítja a reprodukálhatóságot.

Miltenyi MACS kiteken és beadeken kívül a készülék alkalmas a felhasználó által alkalmazni kívánt, akár fluoreszcens markerekkel jelölt antitestekkel történő, illetve több markerrel végrehajtott, egymás utáni, szekvenciális pozitív szortolásra is.    

Hasznos információk az alábbi oldalon:

https://www.miltenyibiotec.com/US-en/resources/technical-documents/data-sheets.html

Kontaktszemély:

Név

Beosztás

E-mail

Dr. Pós Zoltán

egyetemi docens

Ez az e-mail-cím a szpemrobotok elleni védelem alatt áll. Megtekintéséhez engedélyeznie kell a JavaScript használatát.

Technikai demó:


  • Sejtek kinyerése intakt szövetekből fluoreszcencia-alapú vagy MACS szortoláshoz:

GentleMACSÉlő sejtek kinyerése teljesen vagy részben automatizált módon előre optimalizált enzimatikus kitek vagy a felhasználó által biztosított enzimek segítségével egy Miltenyi gentleMACS™ Octo Dissociator with Heaters készüléken történik.

A készülék teljesen zárt, egyszer használatos steril rendszerekben, steril boxban végzi emberi, egér, patkány vagy egyéb állati biológiai minták szöveti disszociációját optimalizált mechanikus és enzimatikus emésztés révén. A minta finomrezegtetésével a sejtek különösen kíméletes módon szabadulnak fel a szöveti mátrixból. Egyidejűleg 8, akár azonos, akár 8 teljesen különböző szövet párhuzamos feldolgozása lehetséges.  

A Miltenyi Biotec által kínált >20-féle szövet disszociációjára alkalmas kiten kívül a rendszer képes a felhasználó saját enzimeivel és disszociácis protokolljaival is együttműködni. Feldolgozni kívánt szövettől függően a munkafolyamat teljesen (az esetek nagy többsége) vagy némi manuális előkészítést igényel (ritkább).

Hasznos információk az alábbi oldalon:

https://www.miltenyibiotec.com/US-en/products/macs-sample-preparation/tissue-dissociation-kits.html#productlistlink

Kontaktszemély:

Név

Beosztás

E-mail

Dr. Pós Zoltán

egyetemi docens

Ez az e-mail-cím a szpemrobotok elleni védelem alatt áll. Megtekintéséhez engedélyeznie kell a JavaScript használatát.

Technikai demó:

 

Go to top